O valor em branco está subitamente mais alto do que o habitual. Uma amostra contém vestígios de uma substância que, na verdade, não deveria estar ali. Três medições repetidas apresentam resultados diferentes.

A suspeita recai rapidamente sobre o aparelho de medição ou o método. Mas a causa pode ser muito mais discreta: um recipiente de vidro não totalmente limpo, uma pipeta contaminada, água inadequada ou uma espátula que antes foi utilizada para outro reagente.

A contaminação no laboratório não tem de ser visível. Sobretudo na análise de vestígios, quantidades muito pequenas de uma substância estranha podem ser suficientes para aumentar os valores em branco, criar picos ou falsear a concentração medida.

Este guia mostra onde surgem tipicamente as contaminações no laboratório, quais são os oito erros particularmente frequentes e como manusear amostras, reagentes e equipamentos de trabalho de modo a que os resultados de medição permaneçam reprodutíveis.

Índice

O que significa contaminação no laboratório?

Fala-se de contaminação quando uma substância entra em:

• uma amostra,
• um reagente,
• um padrão,
• um recipiente de laboratório,
• um sistema de medição

entra, embora não esteja previsto que ali esteja.

Isso pode ser óbvio.

Por exemplo, utiliza-se acidentalmente a mesma pipeta para duas soluções diferentes.

No entanto, a contaminação é frequentemente invisível.

Alguns microlitros de uma amostra anterior, vestígios de um metal proveniente de um recipiente ou resíduos de um produto de limpeza podem não ser detetados a olho nu.

Os equipamentos analíticos podem, ainda assim, detetá-las em certas circunstâncias.

A Merck salienta que concentrações já muito baixas de contaminantes na química analítica podem gerar sinais de fundo, reduzir a sensibilidade e falsear resultados. Isto aplica-se, em particular, a métodos sensíveis como HPLC, LC-MS, ICP-MS ou cromatografia iónica.

A questão decisiva não é, por isso:

«Este recipiente está visivelmente limpo?»

Mas sim:

«Está suficientemente limpo para a sensibilidade da nossa análise concreta?»

Por que razão podem as mais pequenas impurezas ser problemáticas?

A relevância de uma contaminação depende da relação entre:

concentração a determinar

e

quantidade de substância estranha introduzida

depende.

Exemplo

Determina uma substância na ordem dos por cento.

Alguns microgramas de uma impureza podem ter pouca influência no resultado.

É completamente diferente quando a mesma substância se encontra na:

• Gama de mg/l,
• Gama de µg/l,
• Gama de vestígios

deve ser determinado.

Então, a mesma quantidade de substância estranha pode, de repente, representar uma fração mensurável do sinal total.

Quanto mais sensível for o método, mais limpa tem de ser toda a cadeia de medição

Isto inclui:

• Amostragem,
• Recipiente de amostra,
• Transporte,
• Armazenamento,
• preparação de amostras,
• Reagentes,
• Água,
• Padrões,
• Pipetas,
• Equipamentos de laboratório,
• Sistema de medição.

Afinal, um método sensível não consegue distinguir:

«Esta substância provém da amostra original.»

ou:

«Esta substância foi introduzida pela pipeta durante o trabalho.»

O equipamento mede ambas as coisas.

De onde vêm as contaminações no laboratório?

Existem claramente mais fontes possíveis do que se esperaria à primeira vista.

Outras amostras

Um resíduo da amostra anterior pode ser arrastado para a seguinte.

Reagentes

Também os produtos químicos contêm, dependendo do seu grau de pureza, diferentes quantidades de impurezas.

Água

Iões, compostos orgânicos, partículas e microrganismos podem influenciar os procedimentos analíticos.

Recipientes de vidro e de plástico

Resíduos de utilizações anteriores ou do próprio material do recipiente podem passar para a amostra.

Pipetas e pontas

Líquidos e aerossóis podem contaminar tanto a ponta da pipeta como partes da pipeta.

A Eppendorf distingue, neste contexto, três vias típicas:

• Amostra → Pipeta,
• Pipeta → Amostra,
• Amostra → Amostra.

É precisamente o último ponto que conduz à clássica cross-contamination, ou contaminação cruzada.

Espátulas e outros utensílios de recolha

Um resíduo de pó dificilmente visível pode entrar no frasco de armazenamento seguinte.

Superfície de trabalho

Pós, gotas e poeira podem ser transferidos daí para recipientes ou luvas.

Luvas

Protegem as mãos, mas não são, por si só, uma superfície estéril ou automaticamente livre de contaminação.

Ar

Poeira, aerossóis, vapores de solventes e substâncias gasosas podem afetar amostras sensíveis.

Por isso, o controlo de contaminação não deve consistir numa única medida.

É um princípio de trabalho para toda a cadeia analítica.

Erro 1: Utilizar recipientes de laboratório insuficientemente limpos

Um copo de precipitação parece limpo.

Isso não significa automaticamente que a sua superfície esteja livre de:

• gordura,
• resíduos de produtos de limpeza,
• iões,
• reagentes anteriores,
• resíduos orgânicos

é.

A Merck salienta expressamente, no que respeita ao vidro de laboratório, que mesmo análises realizadas com cuidado podem tornar-se incorretas devido a material de vidro sujo. Em especial nos instrumentos de medição volumétrica, os filmes de gordura podem, por exemplo, afetar a molhabilidade uniforme da superfície do vidro e, consequentemente, o volume de líquido dispensado.

Um exemplo clássico

Um balão volumétrico foi anteriormente utilizado para uma solução salina concentrada.

É enxaguado brevemente com água e, de seguida, utilizado para preparar um padrão para uma análise iónica sensível.

O vidro parece limpo.

Ainda assim, podem ainda existir pequenas quantidades da solução anterior.

Numa amostra altamente concentrada, estes vestígios seriam possivelmente irrelevantes.

No novo padrão, podem, em contrapartida, influenciar significativamente o resultado.

A limpeza tem de ser adequada à aplicação posterior

Nem todos os recipientes de laboratório necessitam do mesmo processo de limpeza.

São decisivos:

• substância utilizada anteriormente,
• aplicação seguinte,
• limite de deteção necessário,
• material do recipiente,
• método de ensaio subjacente.

Uma generalização:

«Lavar uma vez com água é suficiente.»

é, por isso, tão problemático como um:

«Tudo tem de ser sempre limpo com a máxima agressividade.»

Os processos adequados de limpeza e enxaguamento devem ser adaptados ao método em questão e verificados quanto à compatibilidade dos materiais, bem como quanto aos dados de segurança dos produtos químicos utilizados.

Erro 2: Arrastar amostras através de pipetas e instrumentos de recolha

Normalmente, uma pipeta não entra em contacto direto com o líquido.

A ponta é que o faz.

Ainda assim, o interior da pipeta também pode ser contaminado.

A Eppendorf descreve, entre outros, os seguintes mecanismos:

• o líquido entra no cone da pipeta devido a uma utilização incorreta,
• durante a pipetagem formam-se aerossóis,
• Os aerossóis entram no corpo da pipeta,
• A contaminação é novamente transferida para uma nova amostra numa pipetagem posterior.

Erro típico

Com uma pipeta, pipeta-se uma solução padrão altamente concentrada.

De seguida:

• colocar uma nova ponta,
• pipetar a próxima amostra.

A premissa:

Nova ponta = sem contaminação.

Isso pode não ser verdade.

Se anteriormente tiverem entrado líquido ou aerossóis no cone da pipeta, uma nova ponta sozinha não consegue resolver totalmente o problema.

As pontas com filtro podem ser úteis em determinadas aplicações

A Eppendorf descreve as pontas com filtro como uma forma de reduzir a entrada de aerossóis no interior da pipeta.

A ponta adequada depende, no entanto, do procedimento em questão.

Não esquecer a espátula

O mesmo princípio aplica-se aos sólidos.

Utiliza-se uma espátula para:

Substância A.

De seguida, é limpo rapidamente e introduzido em:

Substância B

mergulhado.

Mesmo um pequeno resíduo pode contaminar o segundo frasco de armazenamento.

Por isso, com reagentes e padrões analíticos, vale a pena seguir uma regra simples:

Limpar de forma fiável o utensílio de recolha limpo para cada produto ou entre os produtos.

Erro 3: Devolver produtos químicos retirados ao frasco de stock

Precisa de aproximadamente 20 g de um reagente.

São retirados 24 g do frasco.

Restam quatro gramas.

Voltar a verter?

Melhor não.

O produto retirado pode já ter estado em contacto com:

• Barcos de pesagem,
• Espátula,
• Ar,
• Poeira,
• Luvas,
• Bancada de trabalho.

Se for devolvido, uma possível contaminação não chega apenas a uma única amostra.

Chega a todo o stock restante.

O mesmo se aplica a líquidos.

Uma solução tampão, padrão ou de reagente já transferida para um recipiente de trabalho não deve ser devolvida ao frasco original apenas por motivos de poupança.

Planear melhor

Em vez de retirar uma grande quantidade «por precaução»:

• estimar previamente a quantidade necessária,
• considerar alguma margem,
• retirar o mais próximo possível da necessidade real.

Uma pequena perda de produto é frequentemente mais vantajosa do que um frasco de stock contaminado e, depois, resultados de medição impossíveis de justificar.

Erro 4: Utilizar a qualidade de água errada.

A água é provavelmente o reagente mais utilizado no laboratório.

É precisamente por isso que a sua qualidade é facilmente subestimada.

É utilizado para:

• Diluição,
• Preparação de padrões,
• Preparação de tampões,
• Lavagem de recipientes,
• Limpeza de instrumentos,
• Preparação de amostras em branco.

A Merck salienta que, entre outros:

• Metais pesados,
• Compostos orgânicos,
• Partículas,
• Cloro,
• Microrganismos

podem influenciar os resultados analíticos. Mesmo contaminações ligeiras podem aumentar os sinais de fundo e reduzir a sensibilidade de um método.

Nem toda a água purificada é igualmente adequada para todas as análises

A água de laboratório é classificada em diferentes níveis de qualidade, consoante os requisitos de pureza.

Para métodos muito sensíveis como:

• ICP-MS,
• LC-MS,
• cromatografia de alta resolução

são colocadas exigências claramente mais elevadas do que, por exemplo, à água utilizada na primeira lavagem de recipientes de laboratório comuns.

Exemplo: análise elementar

Nas análises ICP, a água pode ser utilizada praticamente durante todo o processo:

• diluição de amostras,
• preparação de padrões,
• Branco,
• Lavagem de recipientes,
• Limpeza de equipamentos.

Assim, uma contaminação na água é transportada por várias etapas da análise.

Isso faz da água uma fonte de erro particularmente crítica.

Desmineralizado não significa automaticamente ultrapuro

O Biolaboratorium comercializa, por exemplo, água desmineralizada, que pode ser utilizada em numerosas aplicações laboratoriais técnicas e gerais. No entanto, a adequação concreta deve ser sempre avaliada com base nos requisitos do respetivo método.

Para uma análise de vestígios altamente sensível, a designação «desmineralizado» por si só não basta para garantir a adequação.

Erro 5: Deixar amostras e reagentes desnecessariamente abertos

Uma amostra aberta não fica isolada na bancada do laboratório.

Está em contacto com o ar do laboratório.

Desta forma, podem ser introduzidos, entre outros:

• Poeira,
• Aerossóis,
• Vapores de solventes,
• Vapores ácidos,
• Dióxido de carbono.

A Merck descreve, por exemplo, que mesmo a água altamente pura pode absorver rapidamente impurezas quando entra em contacto com o ar do laboratório.

Num exemplo documentado, a resistividade específica da água ultrapura diminuiu significativamente após permanecer aberta durante muito tempo, entre outros motivos, devido à absorção de CO₂ do ar.

Também substâncias voláteis do ambiente do laboratório se podem dissolver em água aberta ou em amostras abertas.

Consequência prática

As amostras, os padrões e os reagentes não devem ficar abertos mais tempo do que o necessário para a respetiva etapa de trabalho.

Isto aplica-se especialmente a:

• análise de vestígios,
• analitos voláteis,
• soluções fortemente ácidas ou alcalinas,
• substâncias higroscópicas,
• Soluções de referência e soluções padrão.

Tampa aberta – passo de trabalho – tampa fechada

Este hábito simples reduz simultaneamente:

• Contaminação,
• Evaporação,
• Absorção de humidade,
• Alteração por CO₂.

Erro 6: Não proteger suficientemente as amostras em branco e os padrões

Uma solução padrão é frequentemente tratada com especial cuidado.

No caso do branco, porém, acontece rapidamente o seguinte:

«Não há lá nada, de qualquer forma.»

É exatamente por isso que o branco é tão importante.

Ele mostra que sinal provém de:

• Reagentes,
• Água,
• Recipientes,
• Preparação,
• Sistema de medição

surge, embora o analito propriamente dito não tenha sido adicionado.

Um branco contaminado pode fornecer indicações valiosas

Se o branco aumentar inesperadamente, a causa pode ser, por exemplo:

• novo reagente,
• água contaminada,
• recipiente insuficientemente limpo,
• Carry-over da corrida anterior,
• pipeta contaminada.

O branco não é, portanto, apenas um valor que se subtrai mais tarde a um resultado.

É um instrumento de controlo da limpeza de todo o processo analítico.

Os padrões também são sensíveis

Uma solução de referência ou solução padrão tem um teor conhecido.

Se for contaminada, perde exatamente essa característica mais importante.

Por isso:

• Não trabalhar diretamente a partir do frasco de reserva com ferramentas possivelmente contaminadas,
• Retirar a quantidade necessária de forma limpa,
• Voltar a fechar imediatamente,
• Não voltar a colocar os restos,
• Respeitar as indicações de armazenamento.

Biolaboratorium disponibiliza, por exemplo, soluções padrão de cálcio definidas para aplicações analíticas. Neste tipo de produtos, um manuseamento limpo é especialmente importante, porque servem precisamente como referência para a medição.

Erro 7: Utilizar recipientes inadequados para a amostra e o padrão

O vidro nem sempre é melhor do que o plástico.

O plástico nem sempre é melhor do que o vidro.

O material adequado depende de qual substância é determinada.

Um recipiente pode influenciar uma amostra, entre outras coisas, através de:

• Adsorção à superfície,
• Libertação de iões,
• Plastificantes,
• Vestígios de substâncias orgânicas,
• Interações com o analito.

A Merck salienta, para análises elementares sensíveis, que a escolha do material do recipiente desempenha um papel importante. Consoante a aplicação, são preferidos, por exemplo, materiais poliméricos de elevada pureza, para reduzir o risco de introdução de determinados iões.

Também o armazenamento pode causar problemas

Uma amostra recém-preparada pode, inicialmente, estar correta.

No entanto, após várias horas ou dias num recipiente inadequado, pode:

• acumular o analito na parede,
• dissolver material do recipiente,
• alterar a concentração por evaporação.

Por isso, a escolha do recipiente deve fazer parte do método.

Não:

«Que frasco está livre neste momento?»

mas antes:

«Que material é adequado para este analito e este método?»

Erro 8: subestimar o arrastamento entre diferentes amostras

A primeira amostra contém:

1000 mg/l de uma substância.

A amostra seguinte contém, na verdade:

0,1 mg/l.

Entre ambas as medições, permanece uma quantidade residual minúscula no:

• tubo,
• sistema de injeção,
• sensor,
• sistema de pipetagem,
• recipiente,
• célula de medição.

De repente, a segunda amostra apresenta um valor muito mais elevado.

Isso é designado por carry-over ou arrastamento.

Em caso de grandes diferenças de concentração, mesmo um resíduo muito pequeno da amostra anterior pode tornar-se relevante.

Por isso, a ordem das amostras nem sempre é arbitrária

Se possível, pode ser sensato:

• trabalhar de concentrações baixas para concentrações mais elevadas,
• planear passos de lavagem adequados,
• realizar um controlo após amostras muito concentradas.

O procedimento exato depende do método de análise.

Não só os instrumentos causam carry-over

Também no trabalho manual ocorre arrastamento.

Exemplo:

Um elétrodo é retirado de uma amostra muito concentrada e apenas deixado a escorrer brevemente.

De seguida, é colocada diretamente na amostra seguinte.

Restos da primeira amostra são transferidos.

A Metrohm salienta expressamente, no caso de elétrodos de titulação, que é necessária uma limpeza adequada entre medições, para que a amostra ou o titulante não sejam transferidos para a análise seguinte.

Porque é que as luvas não evitam automaticamente a contaminação

No laboratório, as luvas são um elemento importante da segurança no trabalho, quando a avaliação de riscos e os produtos químicos utilizados as exigem.

Mas têm uma característica que é facilmente esquecida:

As luvas podem elas próprias ser contaminadas.

Uma sequência típica:

1. abrir a amostra.
2. tocar no gargalo do frasco.
3. tocar na pipeta.
4. utilizar o computador.
5. abrir o frasco seguinte.

A luva transporta possíveis resíduos de estação para estação.

A Eppendorf descreve, por exemplo, que as luvas contaminadas podem transferir impurezas para pipetas, que, por sua vez, podem contaminar outras áreas de trabalho ou amostras.

Luva = barreira de proteção, não garantia de limpeza

Por isso, as luvas devem:

• trocadas em caso de contaminação visível,
• utilizadas de acordo com o fluxo de trabalho,
• não usadas de forma acrítica entre áreas limpas e contaminadas

ser.

Também o contacto com:

• smartphone,
• teclado,
• maçaneta da porta

com luvas de laboratório contaminadas pode ser problemático.

Que papel desempenha a pureza dos reagentes?

A contaminação pode já provir do próprio reagente utilizado.

Cada produto químico possui uma especificação.

Além do teor principal, podem constar aí valores limite para:

• Metais,
• Cloretos,
• Sulfatos,
• Água,
• impurezas orgânicas,
• Resíduos.

Numa aplicação técnica robusta, determinadas substâncias concomitantes podem ser completamente inofensivas.

Numa análise sensível, as mesmas substâncias concomitantes podem influenciar o resultado da medição.

Exemplo

A Biolaboratorium oferece ácido nítrico de qualidade analítica, no qual são especificados, entre outros, valores limite para metais pesados, cloretos, sulfatos, ferro e outras impurezas.

Na análise, estas informações são mais importantes do que a afirmação:

«É ácido nítrico.»

Pois dois produtos com o mesmo nome químico podem diferir significativamente quanto às impurezas permitidas.

Escolha a pureza adequada ao método

Por isso, a melhor escolha não é automaticamente:

«Comprar sempre a qualidade mais elevada disponível.»

Mas sim:

«Escolher uma qualidade cuja especificação cumpra os requisitos do método.»

Isto evita, ao mesmo tempo, custos desnecessários e problemas analíticos.

A água como fonte de contaminação subestimada

A água merece especial atenção no controlo de contaminação, porque é utilizada em tantos pontos.

Uma única fonte de água inadequada pode influenciar simultaneamente:

• Brancos,
• soluções padrão,
• diluição de amostras,
• limpeza de vidraria,
• fases móveis,
• Enxaguamento de instrumentos.

Contaminação orgânica

Em HPLC e LC-MS, as impurezas orgânicas podem, entre outras coisas, provocar:

• fundo elevado,
• Deriva da linha de base,
• Picos fantasma

levar.

Contaminação iónica

Na cromatografia iónica, AAS ou ICP-MS, mesmo pequenas quantidades de determinados iões podem influenciar a medição.

Partículas

As partículas podem:

• Sobrecarregar componentes dos equipamentos,
• Perturbar sinais de medição,
• Adsorver substâncias.

Microrganismos

Também as cargas microbiológicas podem alterar a qualidade da água.

Por isso, a qualidade da água nunca deve ser avaliada apenas pela aparência.

A água límpida pode ser analiticamente inadequada.

Como saber se os recipientes de laboratório estão suficientemente limpos?

Não existe um teste rápido universal que, para qualquer aplicação analítica, diga com fiabilidade:

«Este recipiente está suficientemente limpo.»

Em material de vidro comum, uma molhagem uniforme da superfície pode indicar que não existem filmes de gordura fortes. A Merck refere este comportamento como um critério clássico para a limpeza de vidro de laboratório.

No entanto, uma inspeção visual não é suficiente para análises sensíveis.

Aí podem, por exemplo:

• Amostras em branco,
• Controlos de enxaguamento,
• Brancos de método,
• controlos sistemáticos de qualidade

ser necessário.

A limpeza depende da aplicação

Um balão pode estar suficientemente limpo para:

uma verificação técnica do pH

e, ao mesmo tempo, inadequado para:

uma análise de traços por ICP-MS.

Portanto, o limite de deteção do método também determina quão rigoroso deve ser o controlo da contaminação.

Por que razão a análise de traços é especialmente sensível

Quanto mais baixa for a concentração procurada, maior será a relação entre uma possível quantidade de substância estranha e o analito propriamente dito.

Isto pode ser demonstrado com um exemplo simples.

Uma amostra contém:

1 mg da substância procurada.

Uma contaminação de:

0,001 mg

corresponde a:

0,1 %.

Se, pelo contrário, a amostra contiver apenas:

0,001 mg

e, por contaminação, também entram:

0,001 mg

além disso,

o resultado aparente pode duplicar-se.

É exatamente por isso que, em análises de traços, são colocadas exigências tão elevadas a:

• Pureza dos reagentes,
• Água,
• Recipientes,
• Ambiente,
• Brancos,
• Manuseamento de amostras.

A Merck salienta expressamente, no contexto da ICP-MS, que, além da qualidade da água, também o grau de pureza dos ácidos, o material dos recipientes e o ambiente do laboratório influenciam a qualidade analítica alcançável.

O que revela um branco anómalo?

Um branco elevado é incómodo.

Ao mesmo tempo, tem um valor diagnóstico.

Ele diz:

Em algum ponto do nosso processo analítico já surge um sinal, embora o analito não devesse estar presente na própria amostra.

Delimitar sistematicamente as possíveis causas

Verificar a água

Foi utilizada uma nova fonte de água?

Verificar os reagentes

Foi aberto um novo lote?

Verificar os recipientes

Foram limpas de forma diferente?

Verificar as pipetas

Houve antes uma amostra muito concentrada?

Verificar o equipamento

É possível que ocorra carry-over?

Verificar o ambiente

Trabalhou-se noutro posto de trabalho?

Não corrigir imediatamente apenas de forma matemática

Um branco pode ser considerado no cálculo de acordo com o método.

No entanto, um branco subitamente invulgarmente elevado deve, ainda assim, ser investigado.

Se a causa for uma contaminação forte, a simples subtração do branco pode ocultar o verdadeiro problema de qualidade.

Por que razão os padrões devem ser tratados separadamente das amostras desconhecidas

Uma solução padrão é especialmente valiosa porque a sua concentração é conhecida.

É exatamente por isso que deve ter o menor número possível de oportunidades de entrar em contacto com amostras desconhecidas.

Uma organização de trabalho adequada pode significar, por exemplo:

• preparar os padrões separadamente,
• utilizar instrumentos de trabalho limpos,
• identificar claramente os recipientes de amostragem,
• não voltar a colocar soluções padrão em excesso.

Trabalhar do mais baixo para o mais alto

Nas séries de calibração, dependendo do método, pode ser útil começar com concentrações baixas e avançar progressivamente para concentrações mais elevadas.

Assim, é possível reduzir o risco de um padrão altamente concentrado influenciar um padrão subsequente de concentração muito baixa.

No entanto, a sequência concreta deve corresponder sempre ao método de medição e ao equipamento.

Contaminação por limpeza incorreta: também «demasiado» pode ser problemático

A própria limpeza pode tornar-se uma fonte de contaminação.

Exemplos:

• o detergente permanece na superfície do vidro,
• a solução de limpeza não é removida suficientemente,
• um solvente errado deixa resíduos,
• a água utilizada introduz novos iões.

Por isso, um processo de limpeza não deve ser avaliado pela «força» do produto utilizado.

Mas sim no seguinte:

Remove os resíduos relevantes sem introduzir novas substâncias que interfiram na análise?

Em análises especiais, um solvente de alta pureza pode ser relevante.

Biolaboratorium oferece, por exemplo, acetona p.d.a. com um teor mínimo de 99,5 %, bem como variantes com requisitos especificados relativamente a determinadas impurezas. No entanto, saber se a acetona é adequada para um determinado passo de limpeza depende sempre do material, do resíduo, do método e dos requisitos de segurança.

Uma recomendação geral como «limpar sempre o material de vidro com acetona» seria, por isso, errada.

Como um processo de trabalho limpo reduz a contaminação

Um bom controlo de contaminação não exige necessariamente técnicas complicadas.

Muito resulta da organização do trabalho.

Separar as áreas

Se possível:

• preparação de amostras,
• preparação de padrões,
• recipientes sujos,
• recipientes limpos

não misturar desnecessariamente.

Rotular claramente os recipientes

Os copos de precipitação sem etiqueta convidam a confusões.

Não trocar as tampas

A tampa de um frasco também pode estar contaminada.

Trocar as pontas das pipetas atempadamente

Não apenas quando algo visível estiver agarrado a ela.

Limpar regularmente a superfície de trabalho

Especialmente após:

• soluções derramadas,
• Trabalhos com pós,
• padrões altamente concentrados.

Não misturar ferramentas limpas e contaminadas

Uma espátula proveniente de uma área utilizada não deve simplesmente voltar para as ferramentas limpas.

Planear o sentido do trabalho

Em análises sensíveis, a ordem pode ajudar:

limpo → menos limpo

ou seja:

baixa concentração → alta concentração.

Assim, reduz-se o risco de levar impurezas de volta para amostras especialmente sensíveis.

8 erros típicos de contaminação num relance

1. Confundir limpo à vista com limpo em termos analíticos

Os resíduos invisíveis podem, ainda assim, ser mensuráveis.

2. Equiparar uma ponta de pipeta nova a uma pipeta limpa

A contaminação também pode estar no corpo da pipeta.

3. Devolver o reagente em excesso

Desta forma, todo o stock pode ser contaminado.

4. Escolher a água apenas com base no termo «purificada»

A pureza necessária depende do método analítico.

5. Deixar os reagentes abertos

O ar, o pó, o CO₂ e os vapores podem influenciar a composição.

6. Tratar brancos e padrões como soluções de trabalho normais

São precisamente estas soluções que têm de ser protegidas de forma especialmente fiável contra substâncias estranhas.

7. Não ter em conta o material do recipiente

Os recipientes podem libertar substâncias ou adsorver analitos.

8. Ignorar o carry-over entre amostras

Uma amostra altamente concentrada pode falsear a amostra seguinte de baixa concentração.

Lista de verificação prática contra a contaminação no laboratório

Antes de começar

• Verificar a superfície de trabalho e, se necessário, limpá-la.
• Preparar os equipamentos e recipientes necessários.
• Compatibilizar a pureza dos reagentes com o método.
• Verificar a qualidade da água.
• Definir padrões e amostras em branco.
• Selecionar materiais adequados para recipientes.
• Disponibilizar pipetas e instrumentos de recolha limpos.

Ao manusear reagentes

• Abrir o frasco apenas durante o tempo necessário.
• Utilizar uma espátula limpa ou uma pipeta adequada.
• Não colocar a tampa sobre superfícies de trabalho sujas.
• Retirar apenas a quantidade necessária.
• Não voltar a colocar o excedente.
• Voltar a fechar imediatamente o frasco.
• Preservar ou documentar o número de lote.

Ao pipetar

• Utilizar uma ponta adequada.
• Não inclinar desnecessariamente a pipeta com a ponta cheia.
• Reduzir a formação de aerossóis através de pipetagem controlada.
• Trocar a ponta entre amostras diferentes.
• Em aplicações adequadas, considerar pontas com filtro.
• Limpar e fazer a manutenção da pipeta regularmente, de acordo com as indicações do fabricante.

No caso dos padrões

• Manusear a solução padrão separadamente das amostras desconhecidas.
• Utilizar recipientes de recolha limpos.
• Não voltar a colocar soluções já utilizadas.
• Ter em conta, a nível organizativo, concentrações baixas e altas.
• Ter em atenção as condições de armazenamento.

No caso dos recipientes de laboratório

• Adaptar a limpeza à aplicação anterior e seguinte.
• Evitar resíduos de produtos de limpeza.
• Escolher os últimos passos de enxaguamento adequados ao método de análise.
• Armazenar os recipientes limpos.
• Selecionar material adequado para a amostra.

Durante a análise

• Respeitar a ordem das amostras.
• Controlar o carry-over.
• Acompanhar os valores em branco.
• Não interpretar imediatamente resultados anómalos como erros da amostra.
• Em caso de valores invulgares, verificar sistematicamente as fontes de contaminação.

Após a análise

• Limpar a superfície de trabalho.
• Limpar pipetas e elétrodos de acordo com os respetivos requisitos.
• Fechar e armazenar corretamente os reagentes.
• Separar equipamentos contaminados dos limpos.
• Documentar valores em branco anómalos.
• Analisar resultados invulgares antes de repetir toda a série de medições.

Uma análise fiável não começa, portanto, apenas no instrumento de medição.

Começa no recipiente limpo, na qualidade de água correta, num reagente adequado e na questão de saber com o que a espátula esteve em contacto cinco minutos antes.

Sobretudo em métodos analíticos sensíveis, as contaminações são traiçoeiras, porque permanecem frequentemente invisíveis. O resultado parece tecnicamente correto. O aparelho não indica nenhum erro. Mesmo assim, é possível que parte do sinal medido não venha de todo da amostra original.

Por isso, perante resultados de medição inesperados, vale a pena olhar para toda a cadeia de medição:

Amostra → Recipiente → Reagente → Água → Equipamento de trabalho → Sistema de medição.

Quem verifica esta cadeia poupa frequentemente mais tempo do que ao reiniciar repetidamente a análise.