De repente, el blanco es más alto que de costumbre. Una muestra contiene trazas de una sustancia que en realidad no debería estar presente. Tres mediciones repetidas arrojan resultados diferentes.

Rápidamente se sospecha del instrumento de medición o del método. Pero la causa puede ser mucho más sutil: un recipiente de vidrio no limpiado por completo, una pipeta contaminada, agua inadecuada o una espátula que se utilizó antes para otro reactivo.

La contaminación en el laboratorio no tiene por qué ser visible. Precisamente en el análisis de trazas, cantidades muy pequeñas de una sustancia extraña pueden bastar para aumentar los blancos, generar picos o falsear la concentración medida.

Esta guía muestra dónde se producen típicamente las contaminaciones en el laboratorio, cuáles son los ocho errores más frecuentes y cómo manipular muestras, reactivos y equipos de trabajo de modo que los resultados de medición sigan siendo reproducibles.

Tabla de contenidos

¿Qué significa contaminación en el laboratorio?

Se habla de contaminación cuando una sustancia entra en:

• una muestra,
• un reactivo,
• un estándar,
• un recipiente de laboratorio,
• un sistema de medición

llega, aunque no está previsto que esté allí.

Esto puede ser evidente.

Por ejemplo, se utiliza accidentalmente la misma pipeta para dos soluciones diferentes.

Sin embargo, a menudo la contaminación es invisible.

Unos microlitros de una muestra anterior, trazas de un metal procedente de un recipiente o residuos de un producto de limpieza pueden no detectarse a simple vista.

Los equipos analíticos pueden detectarlas aun así en determinadas circunstancias.

Merck señala que concentraciones muy bajas de contaminantes en la química analítica ya generan señales de fondo, pueden reducir la sensibilidad y alterar los resultados. Esto afecta especialmente a métodos sensibles como HPLC, LC-MS, ICP-MS o cromatografía iónica.

Por eso, la pregunta decisiva no es:

«¿Está visiblemente limpio este recipiente?»

Sino:

«¿Está suficientemente limpio para la sensibilidad de nuestro análisis concreto?»

¿Por qué pueden ser problemáticas las impurezas más pequeñas?

La relevancia de una contaminación depende de la relación entre:

concentración buscada

y

cantidad de sustancia extraña introducida

depende.

Ejemplo

Se determina una sustancia en el rango porcentual.

Algunos microgramos de una impureza probablemente apenas influirán en el resultado.

La situación es completamente distinta cuando la misma sustancia se encuentra en el:

• Rango de mg/l,
• Rango de µg/l,
• Rango de trazas

debe determinarse.

Entonces, la misma cantidad de sustancia extraña puede representar de repente una parte medible de toda la señal.

Cuanto más sensible sea el método, más limpia debe estar toda la cadena de medición

Esto incluye:

• Toma de muestras,
• Recipiente de muestra,
• Transporte,
• Almacenamiento,
• preparación de muestras,
• Reactivos,
• Agua,
• Estándares,
• Pipetas,
• Equipos de laboratorio,
• Sistema de medición.

Al fin y al cabo, un método sensible no puede distinguir:

«Esta sustancia proviene de la muestra original.»

o:

«Esta sustancia se añadió durante el trabajo desde la pipeta.»

El dispositivo mide ambas cosas.

¿De dónde provienen las contaminaciones en el laboratorio?

Hay muchas más fuentes posibles de las que se esperan a primera vista.

Otras muestras

Un resto de la muestra anterior puede arrastrarse a la siguiente.

Reactivos

Los productos químicos también contienen, dependiendo de su grado de pureza, diferentes cantidades de sustancias acompañantes.

Agua

Los iones, los compuestos orgánicos, las partículas y los microorganismos pueden influir en los procedimientos analíticos.

Recipientes de vidrio y plástico

Los residuos de aplicaciones anteriores o del propio material del recipiente pueden pasar a la muestra.

Pipetas y puntas

El líquido y los aerosoles pueden contaminar tanto la punta de la pipeta como partes de la pipeta.

Eppendorf distingue aquí tres vías típicas:

• Muestra → Pipeta,
• Pipeta → Muestra,
• Muestra → Muestra.

Precisamente el último punto conduce a la clásica contaminación cruzada (Cross-Contamination).

Espátulas y otras herramientas de recogida

Un resto de polvo apenas visible puede llegar al siguiente frasco de reserva.

Superficie de trabajo

Los polvos, las gotas y el polvo pueden transferirse desde allí a recipientes o guantes.

Guantes

Protegen las manos, pero en sí mismos no son una superficie estéril ni automáticamente libre de contaminación.

Aire

El polvo, los aerosoles, los vapores de disolventes y las sustancias gaseosas pueden afectar a las muestras sensibles.

Por eso, el control de contaminación no debería consistir en una sola medida.

Es un principio de trabajo para toda la cadena analítica.

Error 1: Utilizar recipientes de laboratorio no limpiados suficientemente

Un vaso de precipitados parece limpio.

Esto no significa automáticamente que su superficie esté libre de:

• grasa,
• restos de productos de limpieza,
• iones,
• reactivos previos,
• residuos orgánicos

es.

Merck señala expresamente, en el caso del material de vidrio de laboratorio, que incluso los análisis realizados con esmero pueden resultar defectuosos debido a material de vidrio contaminado. En particular, en los instrumentos de medición volumétrica, las películas de grasa pueden, por ejemplo, influir en la humectación uniforme de la superficie del vidrio y, con ello, en el volumen de líquido dispensado.

Un ejemplo clásico

Un matraz aforado se utilizó previamente para una solución salina concentrada.

Se enjuaga brevemente con agua y después se utiliza para preparar un estándar para un análisis de iones sensible.

El vidrio parece limpio.

Aun así, todavía pueden quedar pequeñas cantidades de la solución anterior.

En una muestra muy concentrada, estas trazas podrían ser irrelevantes.

En el nuevo estándar, por el contrario, pueden influir notablemente en el resultado.

La limpieza debe adaptarse a la aplicación posterior

No todos los recipientes de laboratorio necesitan el mismo proceso de limpieza.

Los factores decisivos son:

• sustancia utilizada previamente,
• siguiente aplicación,
• límite de detección requerido,
• material del recipiente,
• método de ensayo subyacente.

Una generalización:

“Con enjuagar una vez con agua basta.”

es, por eso, igual de problemático que un:

“Todo debe limpiarse siempre de la forma más agresiva posible.”

Los procedimientos adecuados de limpieza y enjuague deben adaptarse al método correspondiente y compararse con la compatibilidad de materiales, así como con los datos de seguridad de los productos químicos utilizados.

Error 2: Arrastrar muestras mediante pipetas y herramientas de muestreo

Una pipeta normalmente no toca directamente el líquido.

La punta lo hace.

Aun así, el interior de la pipeta también puede contaminarse.

Eppendorf describe, entre otros, los siguientes mecanismos:

• el líquido llega al cono de la pipeta por una manipulación incorrecta,
• al pipetear se generan aerosoles,
• Los aerosoles llegan al cuerpo de la pipeta,
• En un pipeteo posterior, la contaminación vuelve a transferirse a una nueva muestra.

Error típico

Con una pipeta se pipetea una solución estándar muy concentrada.

Después:

• colocar una punta nueva,
• pipetear la siguiente muestra.

La suposición:

Punta nueva = sin contaminación.

Eso no tiene por qué ser cierto.

Si previamente han entrado líquido o aerosoles en el cono de la pipeta, una punta nueva por sí sola no puede resolver el problema por completo.

Las puntas con filtro pueden ser útiles en determinadas aplicaciones

Eppendorf describe las puntas con filtro como una forma de reducir la entrada de aerosoles en el interior de la pipeta.

Sin embargo, qué punta es adecuada depende del procedimiento en cuestión.

No olvides la espátula

El mismo principio se aplica a los sólidos.

Se utiliza una espátula para:

Sustancia A.

Después se limpia brevemente y se introduce en:

Sustancia B

sumergido.

Incluso un pequeño resto puede contaminar el segundo frasco de reserva.

Por eso, para los reactivos y estándares analíticos vale la pena una regla sencilla:

Limpiar de forma fiable el utensilio de extracción limpio para cada producto o entre productos.

Error 3: Devolver los productos químicos extraídos al frasco de reserva

Necesita aproximadamente 20 g de un reactivo.

Se extraen 24 g del frasco.

Quedan cuatro gramos.

¿Devolverlo al frasco?

Mejor no.

El producto extraído puede que ya haya estado en contacto con:

• pesasustancias,
• espátula,
• aire,
• Polvo,
• guantes,
• Superficie de trabajo.

Si se devuelve, una posible contaminación no solo llega a una muestra individual.

Pasa a todo el stock restante.

Lo mismo se aplica a los líquidos.

Una solución tampón, estándar o de reactivo que ya se haya transferido a un recipiente de trabajo no debe devolverse al frasco original solo por ahorrar.

Planificar mejor

En lugar de extraer una gran cantidad «por si acaso»:

• calcular de antemano la cantidad necesaria,
• tener en cuenta un poco de reserva,
• extraer lo más cerca posible de la necesidad real.

Una pequeña pérdida de producto suele ser más conveniente que un frasco de reserva contaminado y, después, resultados de medición imposibles de explicar.

Error 4: Utilizar la calidad de agua incorrecta

El agua es probablemente el reactivo más utilizado en el laboratorio.

Precisamente por eso, su calidad se subestima con facilidad.

Se utiliza para:

• Dilución,
• Preparación de estándares,
• Preparación de tampones,
• Enjuague de recipientes,
• Limpieza de instrumentos,
• Preparación de muestras blanco.

Merck señala que, entre otros:

• metales pesados,
• compuestos orgánicos,
• Partículas,
• Cloro,
• Microorganismos

pueden influir en los resultados analíticos. Incluso impurezas mínimas pueden aumentar las señales de fondo y reducir la sensibilidad de un método.

No toda agua purificada es igualmente adecuada para cada análisis

El agua de laboratorio se clasifica en diferentes niveles de calidad según los requisitos de pureza.

Para métodos muy sensibles como:

• ICP-MS,
• LC-MS,
• cromatografía de alta resolución

se exigen requisitos mucho más altos que, por ejemplo, al agua para el primer enjuague de recipientes de laboratorio generales.

Ejemplo: análisis elemental

En los análisis ICP, el agua puede utilizarse prácticamente durante todo el proceso:

• Dilución de muestras,
• preparación de estándares,
• Blanco,
• Enjuague de recipientes,
• Limpieza de equipos.

Así, una contaminación en el agua se propaga a través de varias etapas del análisis.

Esto convierte al agua en una fuente de error especialmente crítica.

Desmineralizado no significa automáticamente ultrapuro

Biolaboratorium ofrece, por ejemplo, agua desmineralizada, que puede utilizarse en numerosas aplicaciones técnicas y generales de laboratorio. Sin embargo, la idoneidad concreta siempre debe evaluarse según los requisitos del método correspondiente.

Para un análisis de trazas altamente sensible, la denominación «desmineralizado» por sí sola no basta para garantizar la idoneidad.

Error 5: Dejar muestras y reactivos abiertos innecesariamente

Una muestra abierta no está aislada sobre la mesa del laboratorio.

Está en contacto con el aire del laboratorio.

De este modo pueden introducirse, entre otras cosas:

• Polvo,
• Aerosoles,
• Vapores de disolventes,
• Vapores ácidos,
• Dióxido de carbono.

Merck describe, por ejemplo, que incluso el agua de alta pureza puede absorber rápidamente impurezas al entrar en contacto con el aire del laboratorio.

En un ejemplo documentado, la resistividad específica del agua ultrapura disminuyó notablemente tras permanecer abierta durante mucho tiempo, entre otras causas, por la absorción de CO₂ del aire.

Las sustancias volátiles del entorno del laboratorio también pueden disolverse en agua o en muestras abiertas.

Consecuencia práctica

Las muestras, los estándares y los reactivos no deben permanecer abiertos más tiempo del necesario para cada paso de trabajo.

Esto se aplica especialmente en:

• análisis de trazas,
• analitos volátiles,
• soluciones muy ácidas o alcalinas,
• sustancias higroscópicas,
• Soluciones de referencia y estándar.

Abrir la tapa – paso de trabajo – cerrar la tapa

Esta simple costumbre reduce al mismo tiempo:

• Contaminación,
• Evaporación,
• Absorción de humedad,
• Cambio por CO₂.

Error 6: No proteger suficientemente las muestras en blanco y los estándares

Con frecuencia, una solución estándar se trata con especial cuidado.

En cambio, con el blanco ocurre rápidamente lo siguiente:

«Total, si de todas formas no hay nada dentro.»

Precisamente por eso el blanco es tan importante.

Muestra de qué señal procede:

• Reactivos,
• Agua,
• Recipientes,
• Preparación,
• Sistema de medición

proviene, aunque el analito propiamente dicho no se haya añadido.

Un blanco contaminado puede proporcionar indicios valiosos

Si el blanco aumenta inesperadamente, la causa puede ser, por ejemplo:

• reactivo nuevo,
• agua contaminada,
• recipiente limpiado de forma insuficiente,
• Arrastre de la corrida anterior,
• pipeta contaminada.

El blanco no es, por tanto, solo un valor que después se resta de un resultado.

Es un instrumento de control de la limpieza de todo el proceso analítico.

Los estándares también son sensibles

Una solución de referencia o estándar posee un contenido conocido.

Si se contamina, pierde exactamente esa característica más importante.

Por eso:

• No trabajar directamente desde el frasco de reserva con herramientas posiblemente contaminadas,
• Extraer limpiamente la cantidad necesaria,
• Cerrar de nuevo el cierre inmediatamente,
• No devolver los restos sobrantes al recipiente,
• Tener en cuenta las indicaciones de almacenamiento.

Biolaboratorium ofrece, por ejemplo, soluciones estándar de calcio definidas para aplicaciones analíticas. En este tipo de productos, una manipulación limpia es especialmente importante, ya que sirven precisamente como referencia para la medición.

Error 7: Utilizar recipientes inadecuados para la muestra y el estándar

El vidrio no siempre es mejor que el plástico.

El plástico no siempre es mejor que el vidrio.

El material adecuado depende de qué sustancia se determina.

Un recipiente puede influir en una muestra, entre otras cosas, mediante:

• Adsorción en la superficie,
• Liberación de iones,
• Plastificantes,
• Trazas de sustancias orgánicas,
• Interacciones con el analito.

Merck señala, para análisis elementales sensibles, que la elección del material del recipiente influye. Según la aplicación, por ejemplo, se prefieren materiales poliméricos de alta pureza para reducir el riesgo de introducir determinados iones.

El almacenamiento también puede causar problemas

Una muestra recién preparada puede ser correcta al principio.

Sin embargo, después de varias horas o días en un recipiente inadecuado, puede:

• concentrar el analito en la pared,
• disolver material del recipiente,
• modificar la concentración por evaporación.

Por eso, la elección del recipiente debería ser parte del método.

No:

«¿Qué botella está libre en este momento?»

sino:

«¿Qué material es adecuado para este analito y este método?»

Error 8: subestimar el arrastre entre diferentes muestras

La primera muestra contiene:

1000 mg/l de una sustancia.

La siguiente muestra contiene realmente:

0,1 mg/l.

Entre ambas mediciones queda una cantidad mínima residual en:

• Manguera,
• Sistema de inyección,
• Sensor,
• Sistema de pipeteo,
• Recipiente,
• Celda de medición.

De repente, la segunda muestra presenta un valor mucho más alto.

Esto se denomina Carry-over o arrastre.

En caso de grandes diferencias de concentración, incluso un residuo muy pequeño de la muestra anterior puede volverse relevante.

Por eso, el orden de las muestras no siempre es arbitrario

Si es posible, puede ser útil:

• trabajar de concentraciones bajas a más altas,
• planificar pasos de enjuague adecuados,
• realizar un control después de muestras muy concentradas.

El procedimiento exacto depende del método de análisis.

No solo los instrumentos causan Carry-over

También en el trabajo manual se produce arrastre.

Ejemplo:

Se toma un electrodo de una muestra muy concentrada y solo se deja escurrir brevemente.

Luego se introduce directamente en la siguiente muestra.

Los restos de la primera muestra se transfieren.

Metrohm señala expresamente, en el caso de los electrodos de titulación, que entre mediciones es necesaria una limpieza adecuada para que la muestra o el titulante no se transfieran al siguiente análisis.

Por qué los guantes no evitan automáticamente la contaminación

Los guantes son un elemento importante de la seguridad laboral en el laboratorio, cuando la evaluación de riesgos y las sustancias químicas utilizadas los requieren.

Pero tienen una característica que se olvida fácilmente:

Los guantes mismos pueden contaminarse.

Un procedimiento típico:

1. abrir la muestra.
2. tocar el cuello de la botella.
3. tocar la pipeta.
4. operar el ordenador.
5. abrir la siguiente botella.

El guante transporta posibles residuos de una estación a otra.

Eppendorf describe, por ejemplo, que los guantes contaminados pueden transferir impurezas a las pipetas, que a su vez contaminan otras áreas de trabajo o muestras.

Guante = barrera de protección, no garantía de limpieza

Por eso, los guantes deberían:

• cambiados en caso de contaminación visible,
• usados según el flujo de trabajo,
• no llevados sin criterio entre zonas limpias y contaminadas

ser.

También el contacto con:

• Smartphone,
• Teclado,
• Manija de puerta

con guantes de laboratorio contaminados puede ser problemático.

¿Qué papel desempeña la pureza de los reactivos?

La contaminación puede provenir ya del propio reactivo utilizado.

Cada producto químico posee una especificación.

Además del contenido principal, pueden figurar allí valores límite para:

• Metales,
• Cloruros,
• Sulfatos,
• Agua,
• Impurezas orgánicas,
• Residuos.

En una aplicación técnica robusta, determinadas sustancias acompañantes pueden no ser problemáticas en absoluto.

En un análisis sensible, las mismas sustancias acompañantes pueden influir en el resultado de la medición.

Ejemplo

Biolaboratorium ofrece ácido nítrico de calidad analítica, en el que, entre otros, se especifican valores límite para metales pesados, cloruros, sulfatos, hierro y otras impurezas.

Estos datos son más importantes en el análisis que la afirmación:

„Es ácido nítrico.“

Pues dos productos con el mismo nombre químico pueden diferir considerablemente en cuanto a las impurezas permitidas.

Elegir la pureza adecuada para el método

Por lo tanto, la mejor elección no es automáticamente:

„Comprar siempre la calidad más alta disponible.“

Sino:

„Elegir una calidad cuya especificación cumpla los requisitos del método.“

Esto evita al mismo tiempo costes innecesarios y problemas analíticos.

El agua como fuente de contaminación subestimada

El agua merece especial atención en el control de la contaminación, porque se utiliza en tantos lugares.

Una única fuente de agua inadecuada puede influir simultáneamente en:

• Blancos,
• Soluciones estándar,
• Dilución de muestras,
• Limpieza de vidrio,
• Fases móviles,
• Enjuague de instrumentos.

Contaminación orgánica

En HPLC y LC-MS, las impurezas orgánicas pueden, entre otras cosas, provocar:

• Fondo elevado,
• Deriva de línea base,
• Picos fantasma

provocar.

Contaminación iónica

En cromatografía iónica, AAS o ICP-MS, incluso cantidades pequeñas de ciertos iones pueden influir en la medición.

Partículas

Las partículas pueden:

• Sobrecargar los componentes del equipo,
• Interferir en las señales de medición,
• Adsorber sustancias.

Microorganismos

Las cargas microbiológicas también pueden alterar la calidad del agua.

Por lo tanto, la calidad del agua nunca debe evaluarse solo por su aspecto.

El agua clara puede ser inadecuada para el análisis.

¿Cómo se reconoce si los recipientes de laboratorio están suficientemente limpios?

No existe una prueba rápida universal que diga de forma fiable para cada aplicación analítica:

„Este recipiente está suficientemente limpio.“

En el material de vidrio general, una humectación uniforme de la superficie puede indicar que no hay películas de grasa fuertes. Merck menciona este comportamiento como criterio clásico de limpieza del vidrio de laboratorio.

Para análisis sensibles, una inspección visual no es suficiente.

Allí pueden, por ejemplo:

• Muestras en blanco,
• Controles de enjuague,
• Blancos de método,
• controles de calidad sistemáticos

ser necesario.

La limpieza depende de la aplicación

Un matraz puede estar lo suficientemente limpio para:

una comprobación técnica del pH

y al mismo tiempo inadecuado para:

un análisis de trazas por ICP-MS.

El límite de detección del método determina también en parte cuán estricto debe ser el control de contaminación.

Por qué el análisis de trazas es especialmente sensible

Cuanto menor sea la concentración buscada, mayor será la relación entre una posible cantidad de sustancia extraña y el analito propiamente dicho.

Esto se puede mostrar con un ejemplo sencillo.

Una muestra contiene:

1 mg de la sustancia buscada.

Una contaminación de:

0,001 mg

equivale a:

0,1 %.

Si la muestra, en cambio, solo contiene:

0,001 mg

y por contaminación se añaden también:

0,001 mg

más,

puede duplicarse el resultado supuesto.

Precisamente por eso, en los análisis de trazas se imponen requisitos tan altos a:

• Pureza de los reactivos,
• Agua,
• Recipientes,
• Entorno,
• Blancos,
• Manipulación de muestras.

Merck señala expresamente, en relación con ICP-MS, que además de la calidad del agua, el grado de pureza de los ácidos, el material de los recipientes y el entorno del laboratorio también influyen en la calidad analítica alcanzable.

¿Qué revela un blanco anómalo?

Un blanco alto es molesto.

Al mismo tiempo, es valioso desde el punto de vista diagnóstico.

Él dice:

En algún punto de nuestro proceso analítico ya se genera una señal, aunque el analito no debería estar contenido en la muestra propiamente dicha.

Acotar sistemáticamente las posibles causas

Comprobar el agua

¿Se ha utilizado una nueva fuente de agua?

Comprobar los reactivos

¿Se abrió un lote nuevo?

Comprobar los recipientes

¿Se limpiaron de forma diferente?

Comprobar las pipetas

¿Hubo antes una muestra muy concentrada?

Comprobar el equipo

¿Es posible el carry-over?

Comprobar el entorno

¿Se trabajó en otro puesto de trabajo?

No corregir de inmediato solo matemáticamente

Un blanco puede tenerse en cuenta para el cálculo según el método.

Sin embargo, un blanco repentinamente inusualmente alto debería investigarse de todos modos.

Si la causa es una contaminación intensa, restar simplemente el blanco puede ocultar el verdadero problema de calidad.

Por qué los estándares deben tratarse por separado de las muestras desconocidas

Una solución estándar es especialmente valiosa porque se conoce su concentración.

Precisamente por eso, debería tener la menor oportunidad posible de entrar en contacto con muestras desconocidas.

Una organización del trabajo adecuada puede significar, por ejemplo:

• preparar los estándares por separado,
• utilizar material de trabajo limpio,
• Etiquetar claramente los recipientes de muestreo,
• No devolver las soluciones estándar sobrantes al recipiente original.

Trabajar de concentraciones bajas a altas

En las series de calibración, según el método, puede ser conveniente comenzar con concentraciones bajas e ir avanzando hacia concentraciones más altas.

Así se puede reducir el riesgo de que un estándar de alta concentración influya en un estándar posterior de concentración muy baja.

No obstante, la secuencia concreta siempre debe adaptarse al método de medición y al equipo.

Contaminación por una limpieza incorrecta: incluso «demasiado» puede ser problemático

La propia limpieza puede convertirse en una fuente de contaminación.

Ejemplos:

• el detergente permanece en la superficie del vidrio,
• la solución de limpieza no se elimina lo suficiente,
• un disolvente incorrecto deja residuos,
• el agua utilizada introduce nuevos iones.

Por eso, un procedimiento de limpieza no debería medirse por lo «fuerte» que sea el producto empleado.

Sino en lo siguiente:

¿Elimina los residuos relevantes sin introducir nuevas sustancias que interfieran en el análisis?

En análisis especiales, puede ser relevante un disolvente de alta pureza.

Biolaboratorium ofrece, por ejemplo, acetona p.d.a. con un contenido mínimo del 99,5 %, así como variantes con requisitos especificados para determinadas impurezas. Sin embargo, si la acetona es adecuada para un paso de limpieza concreto depende siempre del material, el residuo, el método y los requisitos de seguridad.

Por eso, una recomendación general como «limpiar siempre el material de vidrio con acetona» sería incorrecta.

Cómo reduce la contaminación un flujo de trabajo limpio

Un buen control de la contaminación no requiere necesariamente una técnica complicada.

Mucho se debe a la organización del trabajo.

Separar las zonas

Si es posible:

• preparación de muestras,
• preparación de estándares,
• recipientes sucios,
• recipientes limpios

no mezclar innecesariamente.

Etiquetar los recipientes de forma inequívoca

Los vasos de precipitados sin etiquetar propician confusiones.

No intercambiar las tapas

El cierre de un frasco también puede estar contaminado.

Cambiar las puntas de pipeta a tiempo

No solo cuando se vea algo adherido a ella.

Limpiar la superficie de trabajo con regularidad

Especialmente después de:

• soluciones derramadas,
• trabajar con polvos,
• estándares muy concentrados.

No mezclar herramientas limpias y contaminadas

Una espátula procedente de una zona usada no debe volver sin más a las herramientas limpias.

Planificar la dirección del trabajo

En análisis sensibles, el orden puede ayudar:

limpio → menos limpio

o bien:

concentración baja → concentración alta.

Así se reduce el riesgo de transferir contaminaciones hacia atrás a muestras especialmente sensibles.

8 errores típicos de contaminación de un vistazo

1. Confundir limpio a simple vista con limpio a nivel analítico

Aun así, los residuos invisibles pueden ser medibles.

2. Equiparar una punta de pipeta nueva con una pipeta limpia

La contaminación también puede encontrarse en el cuerpo de la pipeta.

3. Devolver el reactivo sobrante

Así se puede contaminar todo el suministro.

4. Elegir el agua solo por el término «purificada»

La pureza necesaria depende del método analítico.

5. Dejar los reactivos abiertos

El aire, el polvo, el CO₂ y los vapores pueden influir en la composición.

6. Tratar los blancos y los estándares como soluciones de trabajo normales

Precisamente estas soluciones deben protegerse de forma especialmente fiable frente a sustancias extrañas.

7. No considerar el material del recipiente

Los recipientes pueden liberar sustancias o adsorber analitos.

8. Ignorar el carry-over entre muestras

Una muestra de alta concentración puede falsear la siguiente muestra de baja concentración.

Lista de comprobación práctica contra la contaminación en el laboratorio

Antes de comenzar

• Comprobar la superficie de trabajo y limpiarla si es necesario.
• Preparar los equipos y recipientes necesarios.
• Ajustar la pureza de los reactivos al método.
• Comprobar la calidad del agua.
• Definir los estándares y las muestras en blanco.
• Seleccionar materiales adecuados para los recipientes.
• Preparar pipetas y herramientas de toma limpias.

Al manipular reactivos

• Abrir el frasco solo durante el tiempo necesario.
• Utilizar una espátula limpia o una pipeta adecuada.
• No colocar la tapa sobre superficies de trabajo sucias.
• Extraer únicamente la cantidad necesaria.
• No volver a verter el excedente.
• Volver a cerrar el frasco inmediatamente.
• Conservar o documentar el número de lote.

Al pipetear

• Utilizar la punta adecuada.
• No inclinar innecesariamente la pipeta con la punta llena.
• Reducir la formación de aerosoles mediante pipeteo controlado.
• Cambiar la punta entre diferentes muestras.
• Considerar puntas con filtro en las aplicaciones correspondientes.
• Limpiar y realizar el mantenimiento de la pipeta periódicamente según las indicaciones del fabricante.

En el caso de los estándares

• Manipular la solución estándar por separado de las muestras desconocidas.
• Utilizar recipientes de toma limpios.
• No volver a verter las soluciones consumidas.
• Tener en cuenta a nivel organizativo las concentraciones bajas y altas.
• Tener en cuenta las condiciones de almacenamiento.

En el caso de los recipientes de laboratorio

• Adaptar la limpieza a la aplicación anterior y a la siguiente.
• Evitar residuos de productos de limpieza.
• Elegir los últimos pasos de enjuague según el método de análisis.
• Guardar los recipientes limpios.
• Seleccionar el material adecuado para la muestra.

Durante el análisis

• Respetar el orden de las muestras.
• Controlar el carry-over.
• Observar los valores en blanco.
• No interpretar los resultados anómalos de inmediato como errores de la muestra.
• En caso de valores inusuales, comprobar sistemáticamente las fuentes de contaminación.

Después del análisis

• Limpiar la superficie de trabajo.
• Limpiar las pipetas y los electrodos de acuerdo con sus requisitos.
• Cerrar y almacenar los reactivos correctamente.
• Separar los equipos contaminados de los limpios.
• Documentar los valores en blanco anómalos.
• Analizar los resultados inusuales antes de repetir toda la serie de mediciones.

Por tanto, un análisis fiable no comienza únicamente en el instrumento de medición.

Comienza con el recipiente limpio, la calidad correcta del agua, un reactivo adecuado y la pregunta de con qué había estado en contacto la espátula cinco minutos antes.

Precisamente en los procedimientos analíticos sensibles, las contaminaciones son insidiosas porque a menudo permanecen invisibles. El resultado parece técnicamente correcto. El equipo no informa de ningún error. Aun así, es posible que parte de la señal medida no provenga en absoluto de la muestra original.

Por eso, ante resultados de medición inesperados, vale la pena revisar toda la cadena de medición:

Muestra → Recipiente → Reactivo → Agua → Instrumento de trabajo → Sistema de medición.

Quien controla esta cadena suele ahorrar más tiempo que reiniciando el análisis repetidamente.